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专家采访

如何选择合适的自动化核酸提取仪

【2017-04-17】

前言

DNA技术作为公安机关的技术手段,在侦查破案和服务诉讼中起到了无可替代的尖刀利器作用,作为新时期的证据之王越来越被重视,同时越来越被依赖,随着其应用范围从大案到小案的转化,海量的物证涌进了实验室,让技术人员淹没在繁重的机械劳动中。如何让专业人员发挥专业优势,从无意义的重复中解脱?
高通量、自动化的样本核酸提取应运而生,很多公司推出了全自动核酸提取的仪器,各种原理的都有,乱花渐欲迷人眼。那么,如何选择一款合适的核酸自动提取仪,就得细细推敲了。


核酸提取仪

离心柱法
磁珠法
 
离心柱法
离心柱法全自动核酸提取仪采用离心机和自动移液装置相结合的方法,通量一般在1-12个样本,时间上和手工提取差不多,并不能提高效率,而且价格不便宜,耗材不通用,适合经费充足的实验室使用。

 
磁珠法
磁珠法自动核酸提取仪又分为移液法和磁棒法。
移液法,通过自动移液装置来加入裂解液、磁珠吸附;抽走裂解液,加入漂洗液,磁珠漂洗,抽走漂洗液,加入洗脱缓冲液,释放DNA。从步骤看来没毛病,但是实际上存在很大的问题:为了在去除废液的时候不丢失磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠连同废液被吸掉,每回吸废液的时候总会留下一小部分残液,特别是磁铁在底部的装置,漂洗液不能完全去除,其中的盐和乙醇会影响后面的洗脱效率和PCR成功率;磁铁在侧面的装置残留的液体虽然会少些,但是在洗脱时的效率也不好,依靠的是DNA自行溶解到洗脱缓冲液中,除非通过转板机械臂将提取板转到震荡孵育器上。移液机械臂和转板机械臂的运动需要耗费时间,“往返于路上”的时间长了就降低了整体工作效率,所以有些96自动核酸提取工作站,提取一轮的时间需要150分钟甚至更长。移液提取仪往往需要搭配移液机械臂和转板机械臂,那售价和维护成本肯定杠杠的。

再说磁棒法核酸提取仪,通量通常有8、16、32、48、96通道,相对于移液法,磁棒法的优点是每一步的液体不残留,因为磁棒只带走磁珠,转移到下一个步骤相应的试剂孔中,而且提取过程不需要往返“跑长途”加/弃试剂、移板,48个样品30分钟以内搞定。另外很重要的一点是,带动磁棒的电机要能带动磁套进行液体的快速混匀和搅拌,这样才有利于自动化和有助于漂洗和洗脱的彻底。磁棒法的通量选择最好是32或48通道,96通道的看似通量更高,但是有个很现实的问题,96个磁力棒在从一个板转移至另外一个板的时候,磁力棒上的液体容易在中途滴到别的孔中造成污染,而32、48通道磁力棒的运行轨迹不经过其他样本的上空,所以不会出现交叉污染。


干货分享

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